Is baictéar coagulase-diúltach gram-dearfach é Staphylococcus haemolyticus atá an-choitianta in ospidéil. Le blianta beaga anuas, tá aird mhéadaitheach tugtha ag ionfhabhtuithe a fhaightear san ospidéal mar gheall ar a riosca níos airde. Is féidir le Staphylococcus haemolyticus ionfhabhtuithe craicinn, meiningíteas, peritonitis, agus fiú sepsis a chur faoi deara. Is féidir le moill ar dhiagnóis chliniciúil stádas sláinte a bheith ag dul in olcas, mar sin tá diagnóis thapa S. haemolyticus ríthábhachtach do chóireáil bheacht.
D'fhoilsigh foireann taighde an mhúinteora Ji Tuo ón Roinn Saotharlainne Lárnach in Ospidéal Dara Daoine Lianyungang, an tSín alt "Brath tapa agus amhairc ar Staphylococcus haemolyticus in eiseamail chliniciúla le miRa-lfs" san Journal "Analytica Chimica Acta", le fachtóir tionchair de 6.2.
Forbhreathnú 1.Research
Sa staidéar seo, bunaíodh modh Mira-LFS bunaithe ar ghéin MVAA chun Staphylococcus haemolyticus a bhrath. An teicneolaíocht aimplithe aigéad núicléasaigh isothermal il-einsím aimplithe aimplithe Mira le stiall tástála sreafa cliathánach LFS chun braite pataigine tapa a bhaint amach.
Rinneadh an turgnamh ag 37 céim, agus d'fhéadfaí na torthaí a bhrath laistigh de 9 nóiméad. Ba é an íogaireacht braite {0. 147cfu/imoibriú.
Tá an modh braite MIRA-LFS oiriúnach chun staphylococcus hemolyticus a bhrath i samplaí cliniciúla, ag baint amach an modh POCT chun Staphylococcus hemolyticus a aithint, atá luachmhar do dhiagnóis ghalar tapa agus cóireáil i gceantair le seirbhísí leighis nach bhfuil mórán airde orthu.
D'úsáid an fhoireann taighde MIRA-LFS, qPCR agus modhanna cultúir bhaictéaracha thraidisiúnta chun anailís a dhéanamh ar 95 sampla cliniciúil randamach agus dheimhnigh siad an infheidhmeacht chliniciúil.
2. Modhanna Taighde
Taispeántar an léaráid scéimreach de bhrath Mira-LFS thuas.
D'úsáid an taighde paca aimplithe tapaidh isothermal AMP-Future Biotech (cineál stiall tástála óir collóideach) agus stiallacha tástála braite aigéid núicléasaigh.
Is é an fad primer géine MVAA 30-35 núicléasdí, agus is é fad an táirge aimplithe 100-350 bp. Dearadh 6 phéire primers iarrthóra. Rinneadh anailís Mira ag baint úsáide as gdNA de chaighdeánacha staphylococcus hemolyticus, scrúdaíodh primers iarrthóirí, agus taispeánadh táirgí aimplithe ag baint úsáide as leictreafóiréis ghlóthach 2% agarose.
Ansin dearadh an t -probe bunaithe ar an seicheamh primer ar aghaidh (ag leathnú 16 bp siar). Rinneadh FITC a lipéadú le 5 'deireadh an tóireadóra agus lipéadaíodh an deireadh 3' le blocáil C3. Bain úsáid as THF chun an 31 núicléasd a athsholáthar sa tóireadóir. Is é THF 30 bp ón 5 'deireadh agus 15 bp ón deireadh 3'. Tá biotin lipéadaithe le biotin ag deireadh 5 'an phrimer droim ar ais roghnaithe.
Thairis sin, rinne an fhoireann taighde na coinníollacha imoibriúcháin a uasmhéadú do bhrath Mira-LFS a bhrath Staphylococcus hemolyticus. Tástáil ag 37 céim ag eatraimh 2 nóiméad ó 4 go 12 nóiméad. Taispeántar na torthaí ag am imoibriúcháin 8min agus tá an líne tástála le feiceáil go soiléir. Ina theannta sin, déantar tástálacha ag eatraimh de 5 chéim ó chéim {22-52. Is é an chéim 37-42 an teocht is oiriúnaí do bhrath mira-lfs. Dá bhrí sin, is é an t-am imoibriúcháin is fearr agus an teocht atá ag an modh Mira-LFS le haghaidh Staphylococcus haemolyticus ná 8 nóiméad agus 37 céim, faoi seach. In éineacht leis an toradh deiridh atá á shamhlú ag LFS laistigh de 1 nóiméad, is é 9 nóiméad an t -am braite iomlán.
3. Torthaí TEXPERIMENTEN
Fíorú íogaireachta
Rinneadh measúnacht MIRA-LFS ar chomhchruinnithe difriúla DNA géanómaigh (gDNA) a fuarthas ó chultúir staphylococcus haemolyticus atá caolaithe go srathach (1 0^6-10^0 cfu/ml).
Léirigh anailís aischéimnithe aonaid dóchúlachta gurbh é an LOD 95% arna chinneadh ag an measúnacht MIRA-LFS ná 0. 147 CFU/Imoibriú.
Fíorú sainiúlachta
Trí anailís a dhéanamh ar 18 amhrán miocróbach pataigineach coitianta agus 15 amhrán cliniciúil staphylococcus haemolyticus, socraíodh roghnaíocht Mira-LFS de Staphylococcus haemolyticus. Léirigh na torthaí go raibh an tástáil MIRA-LFS diúltach do 18 baictéar pataigineach eile agus go raibh sé dearfach do 15 sampla cliniciúla fíoraithe de Staphylococcus haemolyticus.
Tá braite Mira-LFS an-roghnach agus tá sé oiriúnach chun Staphylococcus hemolyticus a scagadh.
Tástáil samplach iarbhír
Bailíodh 95 eiseamal go randamach Ospidéal Dara Lianyungang, lena n -áirítear 35 sampla craicinn agus fíochán bog, 16 sampla fuail, 14 sampla sputum agus 30 sampla fola.
Léirigh na torthaí go raibh an modh braite 100% ag teacht leis an modh qPCR. Ina theannta sin, i gcomparáid leis an gcaighdeán óir (GB/T4789. Fíoraíodh na torthaí seo freisin féidearthacht theicniúil an mhodha seo chun Staphylococcus hemolyticus a bhrath i samplaí cliniciúla.
Úsáidtear an modh Mira-LFS chun Staphylococcus hemolyticus a bhrath go tapa. Tá sé éifeachtach, cruinn, simplí, agus ar chostas íseal, agus cabhraíonn sé le cinntí diagnóise agus cóireála tapa a dhéanamh.
Foghlaim faoi theicneolaíocht Mira
Méadaíonn teicneolaíocht aimplithe aigéad núicléasach il-einsímeach AMP-Enzyme aigéid núicléasaigh aigéad núicléasaigh aigéad núicléasach ag teocht tairiseach de 39 céim -42 céim, le ham imoibriúcháin amháin 5-20 nóiméad. Ina theannta sin, níl gá le coinníollacha diana saotharlainne, agus déantar na cásanna iarratais a éagsúlú: ranna saotharlainne ospidéil ginearálta, cúram príomhúil, tástáil tí, réimsí, etc.
Tá foirmeacha táirgí imoibrí éagsúil: púdar triomaithe reo, micreafáin triomaithe reo, etc.; Tá na torthaí taispeána éagsúil: leictreafóiréis fhoirmiú, cuar fluaraiseachta, stiallacha tástála óir collóideach, srl. Tá feidhmíocht chobhsaí ag an imoibrí, tá sé éasca oibriú, agus tá sé áisiúil do stóráil agus iompar.
Le Mira mar an chroí-theicneolaíocht ardáin, tá sraith táirgí tacaíochta forbartha aici, mar shampla "teicneolaíocht scaoilte aigéad núicléasaigh ultra-tapa", "brathadóir fluaraiseachta dé-chainéil isothermal", "córas braite dúnta uathoibríoch go hiomlán uathoibríoch", "gléas braite aigéad núicléasaigh", srl.